Cytometry Part B | Clinical Cytometry Journal
Volumen 94B | Páginas 257–263 | 2018
Características de Rendimiento de un Análisis de Hemoglobinuria Paroxística Nocturna (HPN) No Fluorescente Basada en Aerolisina para la Evaluación Simultánea de Neutrófilos y Monocitos de HPN mediante Citometría De Flujo, de acuerdo con las Directrices de HPN Publicadas
Iuri Marinov,¹* Andrea J. Illingworth,² Miroslav Benko,³ y D. Robert Sutherland⁴
1. Instituto de Hematología y Transfusión Sanguínea, Praga, República Checa
2. Dahl-Chase Diagnostic Services, Bangor, Maine
3. Exbio Praha, Praga, República Checa
4. Departamento de Medicina de Laboratorio, Hospital General de Toronto, Ontario, Canadá
https://doi.org/10.1002/cyto.b.21389
Resumen
Antecedentes: CD157 ha sido reportado recientemente como un marcador útil ligado al glicosilfosfatidilinositol (GPI) para la detección de clones de hemoglobinuria nocturna paroxística (HPN) en pacientes con sospecha de hemoglobinuria nocturna paroxística por citometría de flujo, afectando tanto a neutrófilos como a monocitos. El objetivo de este estudio es probar la viabilidad de un enfoque de proaerolisina marcada con fluoresceína (FLAER) y proponer una alternativa para los laboratorios, donde FLAER no se encuentra disponible.
Métodos: validamos un ensayo de 6 colores de un solo tubo no basado en FLAER dirigido a las estructuras ligadas a GPl CD157, CD24 y CD14. Determinamos sus características de rendimiento en 20 muestras de pacientes con HPN que contenían una variedad de tamaños de clones y comparamos los resultados con un enfoque basado en FLAER previamente validado.
Resultados: El coeficiente de variación (CV) para los análisis de precisión intra e interensayo osciló entre 0.1%, /0.2% y 3,02% / 7.58% para los neutrófilos y entre 0.10% / 0.3% y 5.39% / 6.36% para los monocitos. El coeficiente de determinación (r2) para el análisis de regresión lineal de clones de HPN de 20 pacientes con un rango de 0.06% a 99.7% fue 0.99 en todos los casos, la prueba de rangos de Wilcoxon no mostró diferencias estadísticamente significativas (P>0.05), el análisis de Bland-Altman demostró concordancia en el desempeño con un sesgo medio que oscila entre 0.06 y 0.2.
Conclusión: Nuestros resultados confirman características de rendimiento muy buenas para análisis de precisión intra e interensayo, correlación favorable y concordancia entre los enfoques FLAER y no basados en FLAER, utilizando el marcador CD157 GPI. Nuestra experiencia sugiere que una evaluación simultánea rápida y rentable de los neutrófilos y monocitos de la HPN mediante citometría de flujo sin usar FLAER sea posible en áreas donde FLAER pueda no estar disponible ampliamente. © 2016 Sociedad Internacional de Citometría Clínica.
Terminología clave: HPN; Citometría de Flujo; CD157; enfoque no basado en FLAER.
